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  • 改良Lowry法蛋白定量試劑盒
    2011-4-22 2457
    改良Lowry法蛋白定量試劑盒許多年來Lowry法是zui常用也是被引用次數(shù)zui多的蛋白質(zhì)定量方法。其原理是在堿性條件和福林酚Folin-CiocalteuReagent存在下,銅離子與蛋白質(zhì)形成可溶性蘭色復(fù)合物,在750nm有zui大光吸收值。Lowry法的優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高,對(duì)脂質(zhì)、SDS等干擾物質(zhì)不甚敏感。經(jīng)典Lowry法的主要缺點(diǎn)是,每次蛋白定量之前必須用兩種不同的試劑A和B(ReagentAandB)新鮮配制堿性銅試劑(ReagentC)。堿性銅試劑(ReagentC...

  • 一抗的選擇
    2011-4-21 1495
    一抗的選擇檢測(cè)任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體,需要考慮如下幾種因素:1.分析試驗(yàn)應(yīng)用的類型一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過適用于何種分析類型,如:可以應(yīng)用于WBIHCICCELASA分析等,如果抗體說明書沒有提及的應(yīng)用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型,而僅是說明尚未經(jīng)過此種分析試驗(yàn)驗(yàn)證,如果抗體不適用某些分析試驗(yàn),則會(huì)在抗體說明書上標(biāo)注出來不適于某分析試驗(yàn)。2.樣本的物種應(yīng)選擇物種相同或有交叉反應(yīng)的抗體,抗體可能...

  • 細(xì)胞培養(yǎng)基分類
    2011-4-20 2052
    細(xì)胞培養(yǎng)基分類培養(yǎng)是既是培養(yǎng)細(xì)胞中供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基的種類很多,按其物質(zhì)狀態(tài)分為半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類;按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。1、天然培養(yǎng)基:使用zui普遍的天然培養(yǎng)基是血清,基本以小牛血清zui普遍。血清由于含有多種細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子及其多活性物質(zhì)。與合志培養(yǎng)基合用,能使細(xì)胞碩利增殖生長(zhǎng)。常見使用zui為5-20%。2、合成培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基是根據(jù)細(xì)胞所需物質(zhì)的種類和數(shù)量嚴(yán)格配制而成的...

  • 特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基
    2011-4-12 1966
    培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)??傊琈EM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)AIMV(12005)培養(yǎng)基(SFM)。L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后,L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時(shí)間后會(huì)降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。...

  • 神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)總結(jié)
    2011-4-12 2262
    培養(yǎng)細(xì)胞的*培養(yǎng)基由基礎(chǔ)培養(yǎng)基(如MEM)和添加劑(如血清或無血清培養(yǎng)用的某些確定的激素及生長(zhǎng)因子)組成,培養(yǎng)基的配方一直在改進(jìn),其中包括抗生素和抗有絲分裂劑等等?;A(chǔ)培養(yǎng)基絕大多數(shù)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液(BSS)基礎(chǔ)上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。zui廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle`sMEM的混合物,其中含有13種必須氨基酸、8種維生素。而Ham`sF12也包括非必須氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無機(jī)鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)。ME...

  • 牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用及產(chǎn)生的常見問題(1)
    2011-4-12 2156
    現(xiàn)代生物技術(shù)包括基因工程、細(xì)胞工程、酶工程和發(fā)酵工程,這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切的關(guān)系,特別是在生物醫(yī)藥領(lǐng)域,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多都是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)的,基因工程乙肝疫苗大多是以CHO細(xì)胞作為載體;基因工程抗體藥物的制備也離不開細(xì)胞培養(yǎng)。細(xì)胞工程領(lǐng)域更離不開細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),雜交瘤單克隆抗體的研究制備*是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)的,發(fā)酵工程和酶工程有的也與細(xì)胞培養(yǎng)密切相關(guān)??傊?,細(xì)胞培養(yǎng)在整個(gè)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中起到了很關(guān)鍵的...

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